CARACTERIZACIÓN DEL INFILTRADO INFLAMATORIO EN LA INFECCIÓN NATURAL POR MYCOPLASMA BOVIS: ESTUDIO PRELIMINAR
Ester Párraga-Ros1, Ana García-Galán1, Christian De la Fe1, Joaquín Amores-Iniesta1, Juan Carlos Corrales-Romero1, Xochitl Hernández Martínez1, Carlos Manuel Martínez-Cáceres1, Elena Goyena1, Juan Seva1
(1)-Facultad de Veterinaria. Universidad de Murcia
Mycoplasma bovis (MB) está presente en los cebaderos de ganado bovino, donde participa junto con otros agentes víricos y bacterianos en el complejo respiratorio bovino (CRB). La elevada variabilidad genética y antigénica de MB explica la diversidad de situaciones clínico-epidemiológicas asociadas a la infección y contribuye a la capacidad del patógeno de evadir una respuesta inmune eficaz del hospedador. MB produce neumonía en bovinos jóvenes, causando lesiones histopatológicas diversas que van desde una neumonía broncointersticial e hiperplasia del tejido linfoide asociado a los bronquios (BALT), a una bronconeumonía supurativa y neumonía necrotizante o caseoneocrótica, asociadas fundamentalmente a una respuesta inmune de base celular. Sin embargo, los mecanismos que inducen un tipo de infiltración celular u otro, así como las distintas lesiones, no están suficientemente estudiados. Por ello, el objetivo de este trabajo fue caracterizar la respuesta inmune celular a nivel respiratorio en terneros de cebo infectados de forma natural con MB considerando distintos momentos de infección.
Para la realización de este estudio se utilizaron animales que pertenecían a 3 cebaderos nacionales (n= 42). Se monitorizaron clínicamente durante un mes, contemplando 5 tiempos (T) en períodos de 7 días, desde su entrada al cebadero (T1) con 6-9 meses de edad hasta los 28 días de cebo (T5). En cada tiempo se tomaron muestras de hisopos nasales para cultivo y PCR frente a MB. También se obtuvo suero para el estudio serológico con el fin de detectar la presencia de otros agentes virales como el virus sincitial, diarrea vírica bovina, rinotraqueitis bovina, parainfluenza y coronavirus. Al finalizar el período de engorde, se llevó a cabo un último muestreo post mortem en matadero donde, además de hisopos traqueobronquiales para PCR, se tomaron muestras de pulmón para el estudio histopatológico e inmunohistoquímico. Se diagnosticó el tipo de neumonía y se usó un anticuerpo frente a CD3 para la detección de linfocitos T (Polyclonal Rabbit Anti-Human CD3, DAKO A0452). Las muestras se digitalizaron a una resolución de 0,172 píxeles/mm (Pannoramic MIDI II scanner3D Histech®) para el análisis de imagen con el software Qupath®. El número de células T CD3+ se contabilizó evaluando 5 unidades bronquiales y bronquiolares completas por animal, determinando el porcentaje de infiltrado T-CD3+ en 3 regiones distintas de cada vía respiratoria (epitelio, lámina propia, BALT).
El 69% de los animales fueron positivos a MB por PCR. En ellos se observó un predominio de neumonías intersticiales y/o patrones broncointersticiales a nivel histopatológico, siendo menos frecuentes los CRB. El 6.8% mostraron lesiones caseonecróticas propias de MB en combinación con una respuesta broncointersticial moderada-grave. Todos los animales, incluidos los negativos a MB, fueron positivos también a alguno de los otros agentes virales respiratorios analizados (sincitial/parainfluenza/coronavirus). En relación con el infiltrado linfocitario, los resultados preliminares sugieren una respuesta distinta en función del tiempo en que se infectan con MB. Así, los animales positivos a MB en T1 presentaron mayor porcentaje de linfocitos T-CD3+, particularmente en las regiones de BALT. Sin embargo, en los animales infectados en tiempos posteriores (de T2 en adelante) se evidenció un porcentaje menor de T-CD3+, obteniendo resultados similares a los hallados en los
animales negativos a MB.
En conclusión, la neumonía intersticial y/o broncointersticial es la patología respiratoria que afecta a la mayoría de los terneros de cebo en condiciones de campo a su llegada a matadero. El agente etiológico implicado y el momento de la infección parece condicionar la inmunidad celular local que se desarrolla, pues la presencia de MB en origen incrementa la inflamación peribronquial mediante una respuesta tipo celular T-CD3+ .