Beatriz Oporto ¹, Medelin Ocejo¹, Gorka Aduriz¹, Ana Hurtado¹

(1)-NEIKER – Instituto Vasco de Investigación y Desarrollo Agrario, Departamento de Sanidad Animal, Basque Research & Technology Alliance (BRTA), 48160 Derio, Bizkaia, España

La aparición y diseminación de bacterias multirresistentes se ha convertido en una seria amenaza para la salud pública, haciendo imprescindible establecer sistemas de vigilancia que permitan su detección y control. Los aislados de Escherichia
coli productoras de β-lactamasas de espectro extendido (BLEE y AmpC) destacan por su rápida propagación entre los seres humanos y los animales destinados a la producción de alimentos, por lo que son una excelente diana para la vigilancia. Este estudio tuvo como objetivo caracterizar y comparar mediante secuenciación de genoma completo (WGS), aislados obtenidos de bovinos sanos y de casos clínicos, con el fin de evaluar la diversidad genética de cepas de E.
coli (BLEE/AmpC) multirresistentes presentes en las explotaciones bovinas del Norte de España.

Los aislados procedentes de animales sanos se recogieron de heces rectales de 250 bovinos en dos mataderos del País Vasco durante 2022-2023 procesados en 51 pooles
(cada pool formado por aprox. 5 animales procedentes del mismo matadero y fecha de muestreo). Tras un pre-enriquecimiento, se realizó un subcultivo en medio selectivo agar MacConkey suplementado con cefotaxima (1 mg/L) para el aislamiento de E. coli (BLEE y/o AmpC). Mediante microdilución en placa se determinaron los perfiles de resistencias antimicrobianas, seleccionando para WGS cepas con una variedad de perfiles fenotípicos de multirresistencia representativos. Por otro lado, se seleccionaron aislados de E. coli BLEE y/o AmpC multirresistentes procedentes de casos clínicos (mayoritariamente muestras de origen gastrointestinal) de explotaciones bovinas del norte de España, caracterizados previamente mediante el sistema VITEK®2 (Biomerieux). En total, se secuenciaron los genomas de 38 aislados (12 de sanos y 26 de enfermos) utilizando la tecnología Oxford Nanopore para posteriormente determinar los filogrupos, los perfiles MLST, los determinantes genéticos de resistencia antimicrobiana (DGR), los factores de virulencia (FV) y caracterizar los plásmidos.

Las
cepas de E. coli se clasificaron mayoritariamente en los filogrupos A (44,7%), B1 (26,3%) y C (18,4%), aunque las de bovinos enfermos se asociaron mayoritariamente al filogrupo A (50%) y los sanos al B1 (42%). Los filogrupos D y G fueron minoritarios y exclusivos de animales enfermos. En general, se observó una gran diversidad genómica, con un total de 23 perfiles ST (Sequence Type) de MLST (9 en sanos y 18 en enfermos), la mayoría (16) representados por una única cepa. Cuatro STs (ST-10, ST-58, ST-88, ST-744) se detectaron tanto en animales sanos como en enfermos. Las cepas clínicas presentaron más plásmidos y de mayor tamaño que las de animales sanos (mediana = 93.781 vs. 73.429 bp). Se identificaron hasta 9 tipos de plásmidos según su replicón en cepas de animales enfermos y 7 en sanos, destacando IncF (71,0% aislados), seguido de IncI (42,1%) e IncH (39,5%). El 97,4% de los aislados albergaron plásmidos portadores de FV, siendo los plásmidos IncF los que presentaron un mayor número (>10 FV en el 57,7% aislados de enfermos y 50% en sanos). En un porcentaje muy alto de aislados se identificaron DGRs frente a β-lactámicos (100% aislados), aminoglucósidos (94,7%), antagonistas de la ruta del folato (94,7%), tetraciclinas (84,2%), quinolonas (78,9%) y fenicoles (73,7%), mientras que los DGRs asociados a resistencia a macrólidos (34,2%), rifampicinas (34,2%) y lincosamidas (28,9%) fueron menos prevalentes. El número de genes de resistencia por cepa fue mayor en aislados asociados a casos clínicos que en sanos (mediana = 15 vs.10). Las mutaciones puntuales (SNPs) asociadas a resistencia a quinolonas fueron más prevalentes en animales enfermos (73,1%) que en sanos (8,3%), mientras que el SNP en el promotor ampC, ligado a resistencia a β-lactámicos, fue más frecuente en animales sanos que enfermos (25,0% vs. 7,7%). Todas las cepas clínicas y el 91,7% de las procedentes de animales sanos fueron portadoras de algún plásmido con genes de resistencia (hasta 3 tipos de plásmidos distintos en una misma cepa). Los plásmidos IncH e IncF presentaron la mayor carga de genes de resistencia. El 38,5% de las cepas de animales enfermos y el 25% de las de sanos, portaban 12-20 genes de resistencia a hasta 8 clases de antimicrobianos en un plásmido tipo IncH o IncF. 

La secuenciación de fragmentos largos aplicada a WGS ha permitido profundizar en el conocimiento de las cepas presentes en las explotaciones bovinas, evidenciado la notable diversidad genética de E. coli (BLEE/AmpC) multirresistente, así como la circulación de plásmidos portadores de genes de resistencia y virulencia. Además, se han observado diferencias en la distribución y localización de DGRs entre animales sanos y enfermos. Los resultados de este estudio pueden sentar las bases para implementar estrategias de control y vigilancia más eficaces, que permitan detectar de forma temprana las cepas multirresistentes y limitar su propagación en explotaciones ganaderas, contribuyendo así a mejorar el estado sanitario del rebaño y a reforzar la primera línea de la seguridad alimentaria.

Financiación: Departamento de Alimentación, Desarrollo Rural, Agricultura y Pesca del Gobierno Vasco (Proyecto URAGAN 21-00012).

Celia Bartolome¹, Andrea Puig², Miguel Ruiz², Laura Elvira Partida³

(1)-MSD AH (2)-Ganados Ruigan (3)-MSD Animal Health

Efecto de la
vacunación frente a coronavirus respiratorio bovino sobre la ganancia media
diaria y la salud respiratoria frente a enfermedad respiratoria en terneros
pasteros

Effect of Vaccination Against Bovine Respiratory
Coronavirus on Average Daily Gain and Respiratory Health for Respiratory
Disease in feeder calves

Andrea Puig¹,
Miguel Ruiz¹, Celia Bartolomé², Laura Elvira²

¹ Ganados Ruigan

² MSD Animal Health

El coronavirus
respiratorio bovino (BoCV) es un patógeno endémico mundial en el ganado vacuno,
que juega un papel relevante en el Síndrome Respiratorio Bovino (SRB). Distintos
estudios de prevalencia han puesto de manifiesto su elevada presencia, con un 92%
de los terneros de cebo positivos al virus en hisopado nasal a la entrada (Lillo
y col., 2024). Respecto al impacto de la vacunación intranasal frente a BoCV,
un primer estudio puso de manifiesto como la vacunación a la entrada redujo un
hasta un 36% el riesgo de ser tratado por SRB (Plummer y col., 2004; Erickson y
col., 2024). Dado que recientemente se ha lanzado al mercado una vacuna
intranasal frente a coronavirus decidimos realizar un estudio bajo las
condiciones comerciales de los cebaderos de nuestro país.

OBJETIVO:

El objetivo de
este estudio fue evaluar el efecto de la vacunación frente a BoCV sobre la
ganancia media diaria (GMD) y el riesgo de ser tratado por SRB en un cebadero
de terneros pasteros.

MATERIAL Y
MÉTODOS

Se incluyeron en
el estudio 166 terneros de un mismo origen en Portugal, de raza Limusín o cruce
de Limusín. Los terneros fueron pesados individualmente y clasificados en dos corrales
homogéneos: corral 2 (88 terneros; 255,52 kg; 30 Machos y 58 Hembras) y corral
3 (78 terneros; 269,13 kg; 52 Machos y 26 Hembras).

Se tomaron
muestras de hisopos nasofaríngeos de 6 animales a la entrada (3 de cada lote)
para la detección de patógenos respiratorios mediante PCR. En ambos lotes se
aplicó una misma alimentación y programa vacunal base parenteral, si bien en el
corral 2 se aplicó además una vacuna INtranasal frente a VRSB y Pi3 (Bovilis®
Intranasal RSP) y en el corral 3 se administraron dos vacunas intranasales, una
en cada ollar (frente a VRSB y Pi3, Bovilis® Intranasal RSP, y frente a BoCV, Bovilis®
Nasalgen C).

Para el
seguimiento, en los animales sospechosos de enfermedad, tras la exploración se
registraron los signos clínicos (Tª rectal, disnea, lagrimeo, tos y descarga
nasal) y diagnóstico. Además, se estableció un protocolo de tratamientos que
fue el mismo en ambos lotes. Finalmente, a los 30 días de la vacunación, se pesaron
nuevamente los terneros individualmente.

Para el análisis
estadístico comparativo entre ambos grupos, se aplicó una prueba de
chi-cuadrado para la morbilidad y de t de Student para la GMD.

RESULTADOS

En los hisopos
nasofaríngeos a la entrada se detectó la presencia de Coronavirus respiratorio
(BoCV) y Mannheimia haemolytica en elevada cantidad, y de Virus
Respiratorio Sincital Bovino (VRSB) en moderada cantidad. Los resultados fueron
negativos a IBR, BVD, Pi3 y Mycoplasma bovis.

El seguimiento de
la enfermedad respiratoria puso de manifiesto el menor impacto del SRB en el
corral 3, con una menor morbilidad respiratoria 5,13% frente al 13,64% en el Corral
2. Si bien la diferencia no fue significativa (P > 0,05), sí se observó una
tendencia estadística (P =0,06), lo que pudo deberse a la baja morbilidad que
tuvimos en el estudio.

De hecho, el
corral 3 logró significativamente una mayor ganancia de peso (P<0,05); tanto
a nivel global con 1,45 kg/día, como para ambos sexos (1,55 kg/día en machos y 1,25
kg/día en hembras) Mientras que en el coral 2 la GMD fue de 1,07 kg/día (1,23
kg/día en machos y 0,99 kg/día en hembras).

CONCLUSIONES

Los resultados de
este estudio sugieren que la vacunación intranasal frente a BoCV puede ser una
estrategia interesante a la hora de complementar un plan vacunal parenteral,
con un efecto positivo sobre la salud respiratoria, tanto a nivel de casos
clínicos detectados, como sobre el impacto de ésta en la GMD. Estos hallazgos ponen
de manifiesto la importancia de implementar estrategias de vacunación completas
para optimizar la salud y el bienestar de los terneros de cebo.

CHRISTIAN DE LA FE RODRIGUEZ¹, JUAN CARLOS CORRALES¹, XÓCHITL HERNÁNDEZ¹, JUAN ALCÁZAR², ANTONIO SÁNCHEZ¹, JOAQUÍN AMORES¹, ANTONIO FERNÁNDEZ³, GINÉS LUJÁN³, DAVID DEL OLMO⁴, HECTOR RAMÍREZ⁵, ANA MARTÍNEZ-EXPÓSITO⁴, ALEJANDRO SÁNCHEZ⁵

(1)-UNIVERSIDAD DE MURCIA (2)-CARGILL SL (3)-ADS DE BOVINO DE LORCA
(4)-JUAN JIMÉNEZ GARCÍA SAU (5)-BOS NOSTRUM SL

El presente trabajo se ha desarrollado para determinar si es habitual que diferentes subtipos de Mycoplasma bovis (Mb) circulen a la vez en un mismo lote de terneros, caracterizando los aislamientos de Mb procedentes de algunos lotes en diversos cebaderos. La interacción entre los agentes patógenos es un campo de trabajo que requiere aun el desarrollo de muchos trabajos y estudios para analizar el impacto práctico de la misma, y en el caso de Mb, la variabilidad de agentes en el mismo lote puede explicar las dificultades relacionadas con el control de la infección en muchas ocasiones.

Para ello, se ha realizado el seguimiento semanal de la presencia de Mycoplasma bovis (Mb) en un conjunto de terneros (n=90) pertenecientes a 6 lotes diferentes de cebo, monitorizando la presencia del agente durante el primer mes de estancia en los cebaderos (t0 a t4). Para ello, se han recogido hisopos nasofaríngeos en los terneros y se han realizado técnicas de aislamiento e identificación de micoplasmas. Donde se detectó la presencia de Mb, se han caracterizado molecularmente los aislamientos obtenidos mediante la secuenciación del gen polC, para definir el subtipo. 

Globalmente, los resultados obtenidos han permitido detectar la presencia de 3 biotipos (ST1, ST2 y ST3) que pueden encontrarse en el mismo lote e incluso, en el mismo animal al mismo tiempo, y evidencia la convivencia y las posibilidades de interacción de diferentes subtipos de Mb. Teniendo en cuenta que nuestro grupo ha evidenciado en los aislamientos de campo de Mb: 1) la presencia de aislamientos que resultan ser “un mosaico” de genes de diferentes aislamientos, 2) la transferencia horizontal de partes del cromosoma entre los aislamientos de esta bacteria, muy probablemente durante coinfecciones por múltiples cepas y 3) la transferencia horizontal clásica de fagos y de elementos integrativos-conjugativos (ICEs) (García-Galán et al., 2022), la presencia de diferentes subtipos circulantes al mismo tiempo en varios de los lotes en cebo analizados confirma  la amplia diversidad y reorganización del genoma dentro de esta especie y su capacidad de generar esas infecciones mixtas en los colectivos.

La variabilidad de Mb en los lotes de engorde, en ocasiones incluso dentro del mismo animal, hace necesario seguir estudiando y analizando su posible impacto en el diagnóstico y el control de la infección en el conjunto del complejo respiratorio bovino (CRB).

JUANA MARIA NAJARRO PUCUHUAYLA¹

(1)-UNIVERSIDAD PERUANA CAYETANO HEREDIA

VERSIÓN  ESPAÑOL 

La mastitis bovina es una patología de consideración en la producción láctea, por su prevalencia, recurrencia y pérdidas económicas, siendo por ende una de las enfermedades de mayor importancia en un hato lechero. En tal sentido se diseñó el presente estudio con el objetivo de identificar los agentes patógenos que generan la mastitis clínica y subclínica en hatos Brown Swiss de producción láctea ubicados en Melgar, Puno, Perú. Se realizó un estudio transversal en 171 vacas en lactación, empleándose la prueba de CMT para el diagnóstico de mastitis subclínica y la prueba de fondo negro para la mastitis clínica. Se tomaron muestras de leche de vacas con mastitis clínica y subclínica (2+ y 3+); para la identificación de los patógenos se realizó cultivos, microscopia, pruebas bioquímicas y para la resistencia antimicrobiana se determinó por el método de Kirby-Bauer. La frecuencia de mastitis subclínica fue de 42,1% (72 vacas con 55 cepas) y de mastitis clínica 2,92% (5 vacas con 8 cepas). La frecuencia de los patógenos identificados en mastitis subclínica fueron de Staphylococcus aureus 52,7%, Staphylococcus intermedius 23,6%, Staphylococcus hyicus 12,7%, Staphylococcus sp. 7,3% y Streptococcus uberis 3,6%; y en mastitis clínica fue de S. aureus 50%, S. intermedius 25% y S. hyicus 25%. El antibiograma determinó una resistencia antimicrobiana para neomicina de 32,3 %, penicilina g de 17,1%, oxitetraciclina de 25,3%, cefalexina de 7%, amoxicilina con ácido clavulánico de 4,4%, ceftriaxona de 10,1%, enrofloxacina de 0,6%, ceftiofur de 1,9% y ceftazidima de 1,3 %, no hubo resistencia con gentamicina, florfenicol, sulfatrimetropim y estreptomicina. El análisis de datos se realizó utilizando estadística descriptiva, en Microsoft Excel 2019 y EpiTools epidemiological calculators. S. aureus, S. intermedius y S. hyicus fueron los principales patógenos en mastitis clínica y subclínica bovina, con alta frecuencia y resistencia antimicrobiana. La sensibilidad in vitro a neomicina, oxitetraciclina y penicilina g fue ineficiente, mientras gentamicina, florfenicol, sulfatrimetropim y estreptomicina resultaron efectivos.

VERSIÓN  INGLÈS:

Bovine mastitis is a major pathology in dairy production, due to its prevalence, recurrence and economic losses, and is therefore one of the most important diseases in a dairy herd. In this sense, the present study was designed with the objective of identifying the pathogens that generate clinical and subclinical mastitis in Brown Swiss dairy herds located in Melgar, Puno, Peru. A cross-sectional study was conducted in 171 lactating cows, using the CMT test for the diagnosis of subclinical mastitis and the black background test for clinical mastitis. Milk samples were taken from cows with clinical and subclinical mastitis (2+ and 3+); For the identification of pathogens, cultures, microscopy, biochemical tests were performed, and for antimicrobial resistance, it was determined by the Kirby-Bauer method. The frequency of subclinical mastitis was 42,1% (72 cows with 55 strains) and clinical mastitis was 2,92% (5 cows with 8 strains). The frequency of pathogens identified in subclinical mastitis was Staphylococcus aureus 52,7%, Staphylococcus intermedius 23,6%, Staphylococcus hyicus 12,7%, Staphylococcus sp. 7,3% and Streptococcus uberis 3,6%; and in clinical mastitis it was S. aureus 50%, S. intermedius 25% and S. hyicus 25%. The antimicrobial susceptibility test determined an antimicrobial resistance for neomycin of 32,3%, penicillin g of 17,1%, oxytetracycline of 25,3%, cephalexin of 7%, amoxicillin with clavulanic acid of 4,4%, ceftriaxone of 10,1%, enrofloxacin of 0,6%, ceftiofur of 1,9% and ceftazidime of 1,3%, there was no resistance with gentamicin, florfenicol, sulfatrimetropim and streptomycin. Data analysis was performed using descriptive statistics, Microsoft Excel 2019 and EpiTools epidemiological calculators. S. aureus, S. intermedius and S. hyicus were the main pathogens in clinical and subclinical bovine mastitis, with high frequency and antimicrobial resistance. In vitro sensitivity to neomycin, oxytetracycline and penicillin g was inefficient, while gentamicin, florfenicol, sulfatrimetropim and streptomycin were effective. 

Jaime ALCAÑIZ¹

(1)-JEFO

Josep Soler Cucurella¹, Rui Esteves Lopes², Amanda Hettiarachchi³, Sebastiaan Theuns³

(1)-Irod Servet SLP (2)-Huvepharma (3)-PathoSense BV

Objetivos

El uso de antibióticos para tratar diarreas en terneros, aunque necesario, puede tener efectos significativos en la microbiota intestinal. Este delicado ecosistema desempeña un papel vital en la digestión, el desarrollo inmunológico y la protección contra patógenos. Alterar este equilibrio mediante el uso de antibióticos puede generar problemas tanto a corto como a largo plazo, afectando la salud y el rendimiento productivo de los terneros.

El objetivo principal del estudio fue analizar la influencia de los antibióticos en la microbiota intestinal, el consumo de pienso y la ganancia de peso en los terneros.

Materiales y Método

El estudio se llevó a cabo durante 42 días, incluyendo un total de 24 terneros distribuidos en cuatro grupos homogéneos de seis individuos cada uno. Se evaluó el impacto de tres tratamientos antibióticos orales diferentes (paromomicina [Parofor®], apramicina [Apravet®] y neomicina) administrados en casos de diarrea, comparándolos con un grupo control que no recibió antibióticos orales.

La microbiota intestinal se analizó mediante dos métricas clave:

• Diversidad
  alfa: mide la diversidad de especies microbianas dentro de cada muestra, calculada mediante el índice de diversidad de Shannon.
• Diversidad
  beta: evalúa las diferencias en la composición bacteriana entre grupos.

Los datos de consumo de pienso se registraron durante todo el período del estudio y el crecimiento se evaluó mediante mediciones regulares individuales de peso.

Resultados

Impacto de los antibióticos en la microbiota intestinal

1. Diversidad
   Alfa: Los grupos control y paromomicina mostraron una diversidad alfa similar, más alta que en los otros grupos, especialmente al final del estudio (día 42). Esto sugiere que paromomicina tiene un impacto limitado en el equilibrio microbiano, preservando la diversidad bacteriana.
2. Diversidad
   Beta: Las composiciones bacterianas del grupo control y el grupo paromomicina fueron similares, lo que refuerza la hipótesis de que paromomicina tiene un efecto mínimo sobre la microbiota. Por el contrario, el grupo tratado con neomicina presentó una composición bacteriana significativamente diferente, indicando una mayor alteración de la microbiota.
3. Abundancia
   de bacterias beneficiosas: Los grupos control y paromomicina
   mostraron una mayor abundancia de bacterias beneficiosas como Lactobacillus
   y Megasphaera, especialmente después del tratamiento (día 7). Estas bacterias son esenciales para la salud intestinal, ya que contribuyen a la fermentación de carbohidratos y a la producción de ácidos grasos de cadena corta, una fuente clave de energía para las células intestinales.

Evolución del consumo de pienso

1. Grupo Paromomicina: Este grupo mostró un consumo acumulado de 239.50 kg, con un patrón estable y consistente a lo largo del ensayo, con la mejor eficiencia alimenticia.
2. Grupo
   Control: Logró el consumo acumulado más alto (244.60 kg). Sin embargo este grupo presentó la eficiencia alimenticia más baja.
3. Grupo Neomicina: Registró el consumo acumulado más bajo (158.80 kg).
4. Grupo Apramicina: Con un consumo acumulado de 212.70 kg, este grupo mostró un desempeño intermedio, aunque menos consistente que los grupos paromomicina y control.

Ganancia de peso

1. Grupo Paromomicina: Este grupo logró la mayor ganancia promedio de peso (27 kg), con baja variabilidad entre los individuos. Además, destacando la efectividaddel tratamiento, solo un ternero presentó diarrea del cual únicamente se aisló un E. coli que presentava elevada cantidad de genes de expresión F17.
2. Grupo
   Control: Aunque los terneros del grupo control
   experimentaron diarrea en la primera semana, alcanzaron una ganancia
   promedio de 23.25 kg. La variabilidad entre los individuos fue alta,
   posiblemente debido a factores individuales.
3. Grupo Neomicina: Con una ganancia promedio de solo 16.5 kg, este grupo mostró el peor resultado.
4. Grupo Apramicina: Los
   terneros mostraron un crecimiento intermedio, con una ganancia promedio de
   23.25 kg, pero con mayor variabilidad en los resultados.

Conclusiones

1. Eficacia
   del tratamiento Paromomicina: Este tratamiento demostró ser el más efectivo al preservar la diversidad y la composición de la microbiota intestinal, fomentando bacterias beneficiosas y promoviendo una digestión eficiente. Los terneros de este grupo lograron la mayor ganancia de peso promedio (27 kg) con mínima variabilidad, destacando una recuperación consistente. Este tratamiento combina eficacia clínica con preservación de la microbiota, asegurando tanto la salud a corto plazo como la productividad a largo plazo.
2. Relevancia
   del grupo control: Aunque los terneros del grupo control padecieron diarrea durante la primera semana, el resultado de varias muestras de heces fue negativo a Salmonella, Cryptosporidium y coccidios, y sólo se aisló un E. coli negativo a factores de virulencia. El hecho de que solo un animal necesitara tratamiento por presentar fiebre, sugiere que, en ausencia de infecciones virulentas, es posible una recuperación sin antibióticos y permitió observar la evolución natural de la microbiota, sirviendo como referencia para evaluar los efectos de los tratamientos.
3. Implicaciones prácticas: Los tratamientos deben seleccionarse no solo por su eficacia clínica, sino también por su capacidad para preservar el equilibrio de la microbiota, un factor esencial para el rendimiento productivo tanto a corto como a largo plazo. Los resultados positivos durante la fase de lactancia también tendrán un impacto beneficioso en la fase de engorde posterior.

Adriana Siurana Marina¹, Cecilia Cajarville², Joselo Repetto², Lorena Castillejos Velázquez¹

(1)-Servei de Nutrició i Benestar Animal (SNIBA), Departamento de Ciencia Animal y de los Alimentos, Universidad Autónoma de Barcelona (2)-Departamento de Ciencia Animal y de los Alimentos, Universidad Autónoma de Barcelona

El sector lácteo enfrenta desafíos que deben ser identificados y priorizados para mejorar su sostenibilidad. Este estudio tiene como objetivo determinar dichas necesidades a través de la recopilación y análisis de datos mediante encuestas dirigidas a los principales actores del sector: ganaderos, veterinarios, industria láctea y consumidores. La información obtenida permitirá establecer un marco de referencia para el desarrollo de tecnologías y prácticas que respondan a las expectativas y demandas de interés.

Para identificar y clasificar los grupos de interés clave, en el marco del proyecto dAiry4.0 (https://dairy40.eu/), realizamos un estudio basado en cuestionarios. Se elaboró y distribuyó una encuesta orientada a los diferentes actores del sector lácteo en toda Europa, utilizando la plataforma EUSurvey (https://ec.europa.eu/eusurvey/runner/dAIry40Survey). La encuesta se dividió en cinco secciones: ganaderos, veterinarios y expertos en ciencia animal, industria alimentaria y consumidores. Para cada grupo se formularon preguntas sobre información general, necesidades y expectativas, y como la tecnología podría ayudar a satisfacerlas. Para asegurar una recopilación de datos comparable entre las personas entrevistadas, se utilizaron preguntas de opción múltiple, de clasificación y tablas de matriz, y sólo se incluyeron preguntas abiertas cuando era estrictamente necesario.

Debido a los requisitos del proyecto europeo, la encuesta estuvo disponible únicamente durante tres semanas. Se obtuvieron 204 respuestas de diferentes países de la UE: España (146), Portugal (1), Holanda (14), Malta (1), Italia (2), Irlanda (1), Grecia (32), Francia (2), Chipre (1), Austria (1), y 3 respuestas sin identificación. Del total de respuestas, 45 correspondieron a ganaderos, 61 a veterinarios y expertos en ciencia animal, 95 a consumidores y 3 a representantes de la industria alimentaria. Dada la baja participación de la industria alimentaria, estos últimos resultados no se consideraron en el análisis.

La media de vacas adultas de los ganaderos entrevistados fue de 251, con un rango de 60 a 1500 vacas. Más del 60% de las granjas producían más de 10.000 L por año. El 59% de los ganaderos indicó tener un sistema intensivo, y de estos, el 55% utilizaba sistemas automáticos de ordeño. Este porcentaje es elevado, pero lógico, ya que este grupo representa la población objetivo del proyecto dAIry4.0. Las principales preocupaciones de los ganaderos fueron el bienestar animal (34%), la calidad de la leche (22%) y el medio ambiente (18%). Respecto a cómo la tecnología podría ayudar, destacaron el monitoreo de la salud animal, la gestión ambiente, la sostenibilidad, el seguimiento del bienestar animal y el aumento de la competitividad.

Respecto a los veterinarios y otros expertos en ciencia animal, las áreas específicas de trabajo indicadas fueron, en primer lugar, la nutrición, seguido por el manejo y bienestar animal. Sus principales prioridades fueron el bienestar animal (30%), los aspectos ambientales (23%) y la calidad de leche (17%), lo cual está alineado con las respuestas de los ganaderos. Más del 80% consideró “muy importante” o “importante” controlar las actividades y el comportamiento de las vacas, implementar programas de gestión y usar sensores para controlar el estrés por calor. Más del 50% consideró “muy importante” o “importante” monitorizar factores ambientales. En cuanto a las tareas a automatizar, más del 80% consideró “muy importante” o “importante” la automatización del ordeño, mientras que más del 50% valoró la automatización de la alimentación, la gestión de la cama, el baño de pezuñas y la separación del estiércol. Finalmente, en el análisis automatizado de la leche, el 91% consideró “muy importante” o “importante” la detección de residuos en la leche. 

El perfil de los consumidores era de más 40 años y con un nivel de educación elevado. El principal criterio que manifestaron al comprar un producto lácteo fue el gusto y el sabor (casi el 100% de los consumidores), y más del 80% consideró también la trazabilidad y el precio como “muy importante” o “importante”. El bienestar animal también fue valorado “muy importante o “importante” por aproximadamente el 70% de los consumidores. En cuanto a la disposición a pagar más, el 72% lo haría por una buena trazabilidad, el 68% por certificados de bienestar animal y el 56% por certificados de huella de carbono.

Aunque el número de respuestas no permite obtener conclusiones definitivas, las observaciones preliminares indican varias tendencias importantes en el sector lácteo:

Ganaderos: Sus principales preocupaciones fueron el bienestar animal y el medio ambiente, y consideran la tecnología como una herramienta para abordar estos desafíos. 

Veterinarios y Expertos en
Ciencia Animal: Priorizaron el control de las actividades y el comportamiento de las vacas, el uso de programas de gestión de rebaños y sensores para detectar el estrés por calor. Además, destacaron la importancia de la automatización del ordeño y otras tareas rutinarias. 

Consumidores: Los factores más valorados al elegir fueron el sabor, el precio y la trazabilidad. El bienestar animal también fue relevante, y una proporción considerable de consumidores mostró disposición a pagar más por productos con certificaciones.

Natalia Elguezabal¹, Maitane Mugica², Elena Molina ¹, Maddi Oyanguren², Ainara Badiola², Gwendal Vidal², Mariví Geijo², Joseba Garrido², Rakel Arrazuria²

(1)-NEIKER-Instituto Vasco de Investigación y Desarrollo Agrario (2)-NEIKER-Instituto Vasco de Investigación y Desarrollo Agario

Gerard Badia Bringué¹, Stephanie Lam², Ángela Cánovas², Marta Alonso-Hearn¹

(1)-NEIKER – Instituto Vasco de Investigacion y Desarrollo Agrario (2)-University of Guelph

La paratuberculosis bovina (PTB) es una enteritis granulomatosa crónica causada por Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis
(MAP) que provoca pérdidas económicas muy importantes al sector de vacuno de leche en todo el mundo. El control de la enfermedad se fundamenta en la aplicación de medidas higiénico-sanitarias en las explotaciones y en el diagnóstico y eliminación de animales infectados. Sin embargo, el diagnóstico está fuertemente condicionado por la falta de sensibilidad de las técnicas de diagnóstico disponibles, por lo que es necesario desarrollar nuevas estrategias de control de la PTB como la selección genética de animales más resistentes o menos susceptibles al a infección por MAP. Análisis previos de asociación a genoma completo (genome-wide association studies, GWAS) han permitido identificar polimorfismos de un solo nucleótido (single nucleotide polymorphisms, SNPs) asociados a la susceptibilidad/resistencia a la PTB. Sin embargo, estos SNPs se localizan en regiones no codificantes, por lo que la identificación de los genes y los mecanismos que influyen en la susceptibilidad/resistencia a la PTB es difícil. El objetivo de este estudio fue identificar SNPs en regiones codificantes del genoma, con efecto deletéreo en las correspondientes proteínas y que aparecieran únicamente en animales sin lesiones o con lesiones focales o difusas asociadas a la PTB. Para ello se utilizaron datos de secuenciación de RNA (RNA-Seq) de muestras de sangre y válvula ileocecal de vacas sin lesiones (N = 4) y con lesiones focales (N = 5) y difusas (N = 5), y se aplicó el flujo de trabajo descrito por Lam et al. (2020), para identificar todas las variantes presentes en los genes expresados en esas muestras. Las lecturas de RNA-Seq se alinearon al genoma de referencia de Bos taurus (ARS-UCD1.2.109) usando
el programa STAR. Para identificar todas las variantes presentes en las lecturas alineadas, se usó el programa BCFtools. Las variantes
identificadas se analizaron mediante Variant Effect Prediction (VEP) para identificar las que tenían efectos deletéreos, y los genes afectados por variantes deletéreas se analizaron con ClusterProfiler para identificar sus funciones, ya que cambios en su función podrían impactar en la regulación de rutas metabólicas importantes. Los SNPs identificados se distribuían a lo largo de todo el genoma, aunque los cromosomas 18 y 23 acumulaban más densidad de SNPs. Se realizaron comparaciones entre los tres grupos para identificar variantes que aparecían únicamente en cada uno de los grupos, obteniéndose un total de 2.128 SNPs únicos de la comparación control vs focal, 2.194 SNPs en la comparación control vs difusa, 2.388 en la comparación focal vs control, 1.956 SNPs en la comparación difusa vs control, 1.939 SNPs en la comparación focal vs difusa, y 1.656 SNPs en la comparación difusa vs focal. De las 856, 625 y 603 variantes identificadas únicamente en vacas sin lesiones, con lesiones focales y con lesiones difusas; 31, 15 y 31 tenían efecto deletéreo, respectivamente. Los SNPs con efecto deletéreo de las vacas sin lesiones se localizaban en regiones codificantes de los genes CHGA, AP3B1 y BOLA. Estos genes están relacionados con producción de colesterol, rutas pro-inflamatorias y presentación de antígenos. Los SNPs deletéreos en estos genes podrían mejorar la homeostasis del colesterol y aumentar la resistencia a la infección por MAP. En vacas con lesiones focales, los SNPs con efecto deletéreo afectaban los genes ORMDL3
y KANK2, asociados a la inhibición de muerte celular programada, procesos de biosíntesis y metabolismo celular. Estos genes están asociados a diferentes enfermedades inflamatorias humanas, por lo que mutaciones deletéreas en estos genes pueden afectar a su función, lo cual podría resultar en el control de la inflamación y carga de MAP propia de los estadios subclínicos de la infección. En las vacas con lesiones difusas, los SNPs deletéreos afectaban a varios miembros de la familia de genes BOLA. Determinadas variantes con efecto deletéreo en los genes BOLA podrían influir en la capacidad del sistema inmune de responder de manera adecuada a la infección por MAP. Por tanto, las variantes en los genes BOLA detectados en las vacas sin lesiones podrían estar confiriendo más resistencia, mientras que las identificados en vacas con lesiones difusas conferirían una mayor susceptibilidad mediante la exacerbación de la respuesta pro-inflamatoria, tal y como se ha observado en humanos. Los resultados permiten ahondar en el conocimiento del papel de la genética en el desarrollo de lesiones asociadas a la PTB y las variantes identificadas podrían usarse para la identificación y selección de animales más susceptibles o resistentes a la infección por MAP.

Financiacion:

RTI2018-094192-R-C21 y PID2021-122197OR-C21 financiados por AEI/10.13039/501100011033 y FEDER, “una manera de hacer Europa”.

Bibliografía:

Lam S, Zeidan J, Miglior F, Suárez-Vega A, Gómez-Redondo I, Fonseca PAS, Guan LL, Waters S, Cánovas A. Development and comparison of RNA-sequencing pipelines for more accurate SNP identification: practical example of functional SNP detection associated with feed efficiency in Nellore beef cattle. BMC Genomics. 2020 Oct 8;21(1):703. doi: 10.1186/s12864-020-07107-7.

Vicente Peña Romero¹, JA Sánchez Castro¹, P Guil Alcalá¹, J Jimenez Atienza¹, S Mroreno Jiménez¹

(1)-Albéitar Clínica Veterinaria Móvil

Stéphane Durosoy¹, Boubacar DIALLO TELLY¹, Stéphane DUROSOY¹, Anne BOUDON²

(1)-Animine SAS (2)-INRAe UMR PEGASE

Se seleccionaron cinco
rebaños lecheros, con un promedio de 89 vacas lecheras, en el sureste de
Francia. Todos los ingredientes de las dietas basales, incluidos los forrajes,
se recolectaron mensualmente y se analizaron mediante ICP-AES (espectroscopia de emisión atómica con plasma
acoplado inductivamente) para determinar el contenido de Zn, Cu, Mn,
S, Mo y Fe. Durante 6 meses, las vacas fueron alimentadas con nuevos alimentos
minerales suplementados con Zn potenciado (HiZox®), Mn purificado (ManGrin®) y
Cu monovalente (CoRouge®) de Animine Precision Minerals (Annecy, Francia). Las
dietas se formularon por granja, para proporcionar 80 y 70 mg/kg de MS para Zn
y Mn, respectivamente, en función de la dieta total (+11% y -20% de Zn y Mn
suplementados en promedio). Dependiendo del nivel de antagonistas de Cu en la
dieta basal (S, Mo y Fe), el Cu total objetivo fue en promedio de 11,7 mg/kg de
MS (-50% en promedio de Cu suplementado). En cada granja, se recolectaron
muestras de sangre 3 veces en el 10% de los animales (n=47; M0=inicio, M3=3
meses y M6=6 meses después del inicio de la prueba) y se analizaron las
concentraciones de Zn, Cu y Mn, así como la actividad de la SODe (enzima  superoxydes dismutases) y de la ceruloplasmina. Los efectos de los nuevos alimentos minerales se
exploraron a través de ANOVA integrando en el modelo estadístico el tratamiento
(M0 vs M3 vs M6) y la granja como efectos fijos y la vaca ubicada dentro de la
granja como un efecto aleatorio. El Zinc en plasma aumentó significativamente
(P=0.000; M6 > M3 > M0; +21%) mientras que el Cu en plasma se mantuvo con
los nuevos alimentos minerales (P=0.079; 13.65 µmol/L en promedio). No se
observaron diferencias estadísticas con respecto al Mn en plasma para M0 y M6,
sin embargo, M3 fue significativamente menor (2.92, 2.82 y 1.96 µg/L
respectivamente). La falta de
respuesta se debe a que el análisis de sangre no es el método de referencia
para evaluar el estado micro-mineral de los animales, debido a la baja
sensibilidad de este método. El hígado sería el mejor indicador, pero dado que
requiere la sacrificio de los animales, no se utilizó en esta prueba. La actividad de la ceruloplasmina aumentó significativamente en M3 en
comparación con M0 (P=0,001; 7628 vs 5708 mU/mL). No se observaron diferencias
estadísticas con respecto a la actividad de SODe (P=0,135). Estos resultados demostraron que el
metabolismo y el estatus mineral del ganado lechero pueden mantenerse
adecuadamente mediante suplementos minerales ajustados a los niveles de Zn, Cu
y Mn.

Carmen Calvo Santalla¹, Verónica Gómez Gómez¹, Luis Vázquez Sande¹, Carmen Eiras Ferreiro², María Isabel Carnero Ojea², Virginia Rubinos Macías², María Stella Polina Fernández², Ignacio Arnaiz Seco²

(1)-Axencia Galega da Calidade Alimentaria-Centro de Investigacións Agrarias de Mabegondo (AGACAL-CIAM). Consellería do Medio Rural. Xunta de Galicia (2)-Laboratorio de Sanidade e Produción Animal de Galicia. Subdirección Xeral de Gandaría. Dirección Xeral de Gandaría, Agricultura e Industrias Agroalimentarias. Consellería do Medio Rural. Xunta de Galicia

1.- Introducción

El herpesvirus bovino tipo 2 (BoHV-2) es un miembro de
la subfamilia Alphaherpesvirinae que, al igual que otros herpesvirus, puede permanecer latente en los ganglios nerviosos. La enfermedad natural se observa en bóvidos y suele presentar una incidencia estacional. Tiene dos formas de presentación: una afecta principalmente a la ubre (la mamilitis herpética bovina) y otra con lesiones cutáneas generalizadas.

Aunque este agente puede influir en el rendimiento productivo de los animales; en Galicia, su importancia radica principalmente en la influencia que pueda tener en el desarrollo del programa de control de la rinotraqueítis infecciosa bovina (IBR) realizado por las Agrupaciones de Defensa Sanitaria Ganaderas (ADSG). Esta influencia se debería a la posible existencia de reacciones cruzadas al usar el ELISA para la detección de anticuerpos frente a la glucoproteína B del herpesvirus bovino tipo 1, tal y como indican estudios realizados en varios países europeos.

El programa de control de la IBR en Galicia se realiza desde 2004. Como resultado, la prevalencia individual de la IBR se sitúa en torno al 4%. En algunas zonas de Galicia donde la prevalencia es muy baja, se han observado resultados anómalos (animales seropositivos en el ELISA-gB/seronegativos en el ELISA-gE) en explotaciones históricamente libres de IBR y en las que no se vacuna frente a esta enfermedad. En estas zonas, desde el 2021, se han detectado animales con anticuerpos frente al BoHV-2.

Ante estos resultados y para poder valorar la importancia que para el programa regional de IBR puede tener la presencia del BoHV-2, se planteó un estudio con el objetivo de determinar la seroprevalencia frente a este herpesvirus y conocer su distribución.

2.- Material y métodos

Se realizó un análisis estratificado según la clasificación zootécnica de la granja, teniendo en cuenta, además, que el número de granjas seleccionadas en cada provincia fuese representativo de su censo. Con este criterio, durante el año 2022 se seleccionaron aleatoriamente 855 granjas de vacuno de entre las enviadas al Laboratorio de Sanidad y Producción Animal de Galicia, y muestreadas en el marco del desarrollo de los programas sanitarios desarrollados en esta Comunidad Autónoma. 

Los sueros (24742) se mantuvieron congelados hasta el momento del análisis. Una vez descongelados, se realizó el ensayo inmunoenzimático para la detección de anticuerpos frente al BoHV-2 mediante el kit ELISA ‘ID Screen BHV-2 Indirect’ (ID.Vet, France) siguiendo las instrucciones del fabricante. Este kit permite clasificar los sueros en tres categorías: negativos, positivos y no concluyentes. En nuestro estudio, una granja se consideró positiva con al menos un animal positivo o no concluyente.

También se estudió si había diferencias teniendo en cuenta la distribución geográfica (considerando la provincia), la clasificación zootécnica (producción de carne o leche), el sistema de producción (extensivo, intensivo o semiextensivo) y la aplicación o no de un programa sanitario de ADSG.

Para el tratamiento y visualización de los datos se utilizaron los programas informáticos IBM® SPSS® Statistic 26 (análisis de frecuencias y prueba de Chi-cuadrado para ver las diferencias entre los grupos) y QGIS 3.26.0-Buenos Aires.

3.- Resultados

Los resultados del estudio de seroprevalencia aparente indican que el porcentaje de animales no negativos fue del 6,9% y el porcentaje de explotaciones positivas fue del 34,2%. Estos resultados pueden estar influenciados por la sensibilidad y especificidad de la prueba, por eso, teniendo en cuenta estos parámetros, la seroprevalencia individual verdadera hallada fue del 5,4%, y el de explotaciones, del 34,1%.

La provincia con mayor porcentaje de granjas positivas fue Ourense (84,8%), seguida de A Coruña (38,1%), Pontevedra (29,6%) y Lugo (27,3%).

El porcentaje de granjas positivas era mayor en la producción de carne (69,2 %) que en la de leche (26,4%), y en las extensivas (47,7%) que en las intensivas (17,6%), situándose las semiextensivas en un punto intermedio (22,4%). Estos resultados pueden explicar el mayor porcentaje de granjas positivas en Ourense, ya que en esta provincia la mayoría de las granjas son de aptitud cárnica. La mayor prevalencia en las granjas de carne frente a las de leche, y en las extensivas con respecto a las semiextensivas e intensivas podría estar relacionado con factores de manejo y con la aplicación de programas sanitarios de vigilancia y control, ya que el porcentaje de granjas positivas de carne que no están en ADSG es mayor que el de las que aplican el programa (38,3 % vs.15,6%), y lo mismo ocurre en las granjas en extensivo (35,7% vs. 18,5%), aunque sería necesario realizar más estudios.

El porcentaje de explotaciones positivas resultó mayor (43,0%) en el grupo de granjas que no estaban en ADSG que las que sí lo estaban (29,3%). En esto podría influir las medidas de bioseguridad y de bienestar animal aplicadas en los programas y que puedan dificultar la introducción de cualquier patología en una explotación.